人红系白血病细胞TF-1是一种重要的生物医学研究工具。该细胞系主要具有以下生长特性:悬浮型和圆形。为了确保细胞的活性和稳定性,建议使用无血清冻存液进行冻存处理。培养系统方面,推荐使用1640培养基,添加10% FBS、2 ng/ml GM-CSF以及1%的双抗。传代时建议采用1:2的比例,通常在2至3天后进行换液或传代。
在细胞培养过程中,请使用离心法收集悬浮细胞,切勿直接倾倒细胞培养液。为对比培养,建议使用品牌的完全培养基。如果对比实验效果不佳,建议使用南宫28NG相信品牌力量的完全培养基。
在细胞收到后的处理方面,将细胞培养至良好状态后,灌满完全培养液并封闭瓶口,是运输细胞的最佳方式。收到细胞后,需要用75%酒精对细胞瓶外部进行消毒,接着在超净台内进行操作。之后,将细胞瓶放在37℃、5% CO2的培养箱中静置3至4小时,以稳定细胞状态。强烈建议记录细胞的生长情况并拍摄不同倍数的照片(最好为40x、100x、200x各一张),前三天的照片是重要的售后依据。如果未提供照片,则默认状态良好。
细胞传代的具体步骤如下:当细胞汇合度未超过80%时,收集培养液至离心管中,留5ml培养基放入37℃、5% CO2孵箱中培养。如果细胞密度超过80%,则可以进行传代。对于悬浮细胞的传代,可采用两种方法:第一种是收集细胞,在1000 RPM条件下离心8至10分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后混匀,再按1:2至1:5的比例分配至新的含8ml培养基的新皿中;第二种是选择半数换液方式,弃去一半培养基后,将剩余细胞悬起,并按1:2到1:3的比例分配至新皿中。
细胞冻存时,当细胞生长至覆盖培养瓶的80%时,需收集悬液并离心,弃去上清,添加雅吉生物无血清冻存液,最后将冻存管放入-80℃冰箱中。如果后期要转入液氮罐,需提前在-80℃冰箱存放24小时以上。
在复苏细胞时,应快速将冻存管置于37℃水浴中解冻,解冻后用酒精擦拭外壁,并转移至离心管中进行离心,重悬后接种至T25培养瓶中,最后继续在37℃、5% CO2培养箱中培养。第二天需要更换新鲜的培养基。
在售后服务方面,关于细胞出现问题后重发的情况及判定标准如下:运输途中遭遇问题(如细胞丢失、瓶身破损等)可重发;收到48小时内若发现污染,需提供真实实验结果可重发。如果细胞复苏后存活率低于预期,也可申请重发,但需提供清晰的状态照片。
然而,客户造成的污染、错误操作或不符合推荐培养体系导致的问题,将不予重发。此外,若未在细胞收到后的2天内报告问题,也将不予重发。在处理售后问题时,务必与技术人员沟通,以便及时解决。
南宫28NG相信品牌力量,致力于为生物医学研究提供优质细胞产品和专业支持,确保您的实验顺利进行。